简介
(1)分离获得对肠黏膜上皮细胞有促进迁移和增殖修复活性的牡蛎活性肽组分。 牡蛎肉优选胰蛋白酶水解,超滤获得的<10k Da组分显示出明显促进IEC-6 细胞株迁移和增殖作用,在预给药培养4 天并在造模后继续给药模式下,造模8 小时后即显示出明显的促进作用,400 μg/ml给药浓度下,迁移面积达空白对照组的2 倍;超滤组分还表现出降低模拟缺氧状态IEC-6细胞株TNF-α表达水平,在500 μg/ml较高浓度下较I/R模型组下降了40 pg/ml水平,显示出促进受损肠黏膜上皮细胞迁移修复,以及在缺血-再灌注损伤过程炎症抑制作用。(2)获得免疫调节作用牡蛎活性肽组分 胰蛋白酶水解产物及超滤分离肽组分可促进RAW264.7 细胞吞噬能力,当<10k Da组分剂量为800μg/ml 时较空白组吞噬率上升23.99%;当剂量为800 μg/ml 时下调LPS 致RAW264.7 细胞分泌NO 水平,最大下调率为达到57.24%,显示出一定免疫调节和抗炎作用。(3)追踪获得牡蛎活性肽并鉴定获得其氨基酸序列信息 利用反相高效液相色谱分离技术,对<5k Da牡蛎肽活性组分进行追踪分离纯化和表征,获得并鉴定了2条具有促进肠黏膜上皮细胞迁移和增殖修复作用活性肽序列(VAPEEHPVLL:MW, 1102.5872 Da;SYELPDGQVITIGNER:MW, 1789.9247 Da)。所获得的2条活性肽在LPS存在条件下,对肠黏膜上皮细胞IEC-6仍分别保持150.81±12.34% (5 μg/ml)和151.73±12.28% (6.25 μg/ml)的增殖促进作用,显示出开发为肠黏膜保护功能食品的潜力。